ABW基质胶分装

ABW基质胶分装

操作步骤

1、收货时，首先确认还有干冰，ABW基质胶成固态，液面水平，如有异常请及时拍照取证并联系我们。

2、整个ABW基质胶只能分装一次，分装前，先放在4℃冰箱，待之融化(切记不要放在冰箱门上或者是经常要敞开口取放试剂的冰箱)。整个分装过程要在预冷分装盒上进行。该次实验用不完的基质胶可以放在4℃存放两周；分装时不做稀释，以原液形式保存。

3、将所需要的实验物品：预冷分装盒、枪头预冷盒等全部用75%酒精消毒后置于超净工作台内。（预冷分装盒、枪头预冷盒事先装好枪头和1.5毫升EP管，高压灭菌后于-20度预冷）

4、超净工作台紫外灭菌15分钟以上。

5、将冻存管或1.5毫升EP管取出，做好标记。

6、将冻存管或1.5毫升EP管做好标记后，打开盖子，注意不要碰到管口。

7、根据每次实验用量分装ABW基质胶，尽量一管为一次实验用量（注意操作时避免袖子不断经过敞口容器上方）。

8、盖好盖子，置于冻存盒或其他合适的容器中，用冰盒转移，防止倾倒，置于-20℃冰箱中保存，若两周内使用，则置于预冷分装盒4℃冰箱内保存即可。

 

 

一些注意事项：

1、实验人员的手心不要接触基质胶，如：要手持装有matrigengel matrix的EP管的上方，防止体温使基质胶成胶凝固；

2、普通 matrigengel matrix 的浓度是8-12mg/ml，高浓度的matrigengel matrix的浓度是16-24mg/ml，具体浓度可通过货号查询；

3、以24孔板为例，做肿瘤细胞侵袭实验时每孔加入matrigengel matrix 20-30ug(一般配成200-300ug/ml 的工作浓度，然后每孔加入100ul即可)。此时，matrigengel matrix是稀释到很低的倍数(有的实验需要低至30倍稀释，具体最适浓度需根据自己的实验进行优化)。铺胶后置于37℃培养箱放置1小时，取出后如果上层有液态培养基，需小心弃去上层的液态培养基即可使用(此时matrigengel matrix沉在底部形成一小薄层)；

4、做内皮细胞的成管实验一般把高浓度的matrigengel matrix (16-24mg/ml)稀释到10mg/ml，由于普通浓度的matrigengel matrix (8-12mg/ml)的浓度接近10mg/ml，所以也可用作成管实验；

5、基质胶跟培养基混合时请使用涡旋仪以确保能够均匀混合。