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因条件限制，实验时从动物房取组织后到细胞间做实验需15分钟。组织是否会失去活性而导致类器官培养失败？

jie*** 浏览：603 评论：0 2023-04-06

根据经验，将组织浸没在pbs中保持4°C左右低温，4H内组织具有形成类器官的能力。
气道上皮类器官类器官有哪些具体方面的应用？

jie*** 浏览：477 评论：0 2023-04-06

气道上皮类器官可用于各种呼吸道疾病的研究。在science和nature期刊有许多这方面文献。
为什么要避免类器官分化?

jie*** 浏览：536 评论：0 2023-04-06

需要避免的并非类器官分化，而是类器官的不定向分化。若是在还需扩增时期类器官提前分化了，则类器官生长速度将大幅减慢若是分化时不按定向目标分化，培养出的类器官可能并非目标类器官。则继续培养就没了意义。这也是我们为什么必须要选择优秀基质胶。
若无可一边培养类器官一边实时观察细胞生长情况的显微镜，如何确保每次观察比对的都是同一个视野?

jie*** 浏览：513 评论：0 2023-04-06

可以选择一个优秀的视野，并在该视野下用标记笔在孔板底部做上标记，往后观察只需找到这个标记调节焦距即可。
在培养类器官时，为什么要尽量避免类器官“贴壁”

jie*** 浏览：575 评论：0 2023-04-06

培养类器官培养时，在基质胶的支撑下，细胞可维持3维结构生长。成为一个个三维结构的细胞团，并以此模拟体内的生长环境。此时若是类器官“贴壁”生长，则基质胶无法良好地达成对细胞的支撑作用。而“贴壁”生长的细胞所分化形成的细胞团，不仅无法良好地模拟体内的生长环境，同时产生不同的组织特性，难以重现器官的生理功能。
种板后为什么要倒扣培养板进行孵化?

jie*** 浏览：548 评论：0 2023-04-06

在基质胶孵育时倒扣细胞可以较好地避免细胞“贴壁”，同时若胶比较稀时细胞会因重力缘故沉底。倒扣培养板可使细胞不沉底避免细胞贴壁导致的无法形成良好的类器官结构。翻转过程不可用力过猛，以免基质胶受力“贴壁”。
气管类器官原代建立时杂细胞与气管碎片极多，有什么方法可以将它们除去呢? 可以使用更小孔径的滤网吗?

jie*** 浏览：567 评论：0 2023-04-06

气管类器官原代建立时不可避免的会有许多的杂细胞和气管碎片。若是红细胞，种板前在细胞悬液中加入红细胞裂解液后离心，弃上清，即可除去。而气管碎片则在类器官传代时便可去除。不建议用更小孔径的滤网过滤细胞悬液，过小的滤网孔径在阻挡杂细胞与气管碎片时也会阻挡目标细胞团。进行种板的细胞若是太小或是为单细胞，则类器官成活率低、生长慢。据过往实验培养效果，100um为该步骤滤网最佳孔径。
气管类器官培养的是哪种细胞? 实验时取用的小鼠气管组织这么小，有足够的成体干细胞吗?

jie*** 浏览：453 评论：0 2023-04-06

气管类器官培养的是气管上皮细胞，原代建立实验收集的气管上皮细胞比较少只能支持48孔板种板3~6孔左右。
怎么保证提出来的细胞纯度及其活力呢?

jie*** 浏览：539 评论：0 2023-04-06

气管原代建立难以保证细胞的纯度，经过传代后类器官的纯度会增加。
肿瘤类器官实验按步骤消化后细胞成活率大概多少？

jie*** 浏览：465 评论：0 2023-04-06

这主要取决于目标肿瘤组织，一般正常操作成活率达到九成以上。

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