在培养小鼠小肠类器官时如何提高隐窝的分离效率和回收率?
jie***
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时间:2023-04-06
1、清洗肠段时不建议采用离心弃上清方法。离心可能会使有毒物质沉降,降低隐窝的分离率和回收率,且操作时间过长影响隐窝活性。可采用重力沉降或转移至洁净容器方法。
2、进行刮隐窝操作时,建议刀片垂直与肠段平行轻轻刮过。刀片不垂直易切断肠组织,力道不易掌控,力道太大可能会将隐窝一并刮下导致悬液中隐窝含量少。刀片与肠段不平行容易残留较多的绒毛。绒毛碎片过多虽不影响隐窝分辨,但阳挡视野不易观察。